《中国普外基础与临床杂志》
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
1.2.1 细胞培养
1.2.2 碘-125粒子照射胃癌细胞
1.2.3 小分子RNA测序法检测微小RNA表达谱
1.2.4 RNA提取、c DNA合成及实时定量PCR分析
1.2.5 细胞转染实验
1.2.6 噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验
1.2.7 Transwell侵袭实验
1.3 统计学处理
2 结果
2.1 小分子RNA测序法检测微小RNA表达谱
2.2 碘-125辐照对胃癌细胞mi R-193b-5p的影响
2.3 mi R-193b-5p基因沉默效率
2.4 mi R-193b-5p对胃癌细胞增殖的影响
2.5 mi R-193b-5p对胃癌细胞侵袭的影响
3 讨论
文章摘要:目的探究碘-125粒子放疗胃癌过程中微小RNA(miR)-193b-5p的作用。方法以胃癌细胞系BGC-823作为对象,建立碘-125粒子体外照射模型,采用小分子RNA测序技术检测miRNA的表达谱。通过实时定量PCR检测碘-125辐照组和非辐照组细胞中miR-193b-5p的表达水平,使用hsa-miR-193b-5p抑制物和相应阴性抑制物转染胃癌细胞系BGC-823建立miR-193b-5p敲减细胞和对照细胞(miR-193b-5p敲减组和对照组),采用噻唑蓝(MTT)检测2组细胞增殖情况,采用Transwell分析2组细胞的侵袭情况。结果碘-125辐照组细胞miR-193b-5p表达水平(0.853±0.180)显著高于非辐照组(0.173±0.045),差异有统计学意义(t=6.371,P <0.05);敲减组细胞miR-193b-5p表达水平(1.264±0.311)明显低于对照组(12.219±2.464),差异有统计学意义(t=-7.640, P<0.05); miR-193b-5p敲减组细胞的增殖能力(0.574±0.382)明显高于对照组细胞(0.424±0.246),差异有统计学意义(t=3.927,P <0.05);miR-193b-5p敲减组细胞侵袭数量(222±23)明显高于对照组细胞侵袭数(40±7),差异有统计学意义(t=-13.293,P <0.05)。结论碘-125放疗胃癌过程中,能通过调控miR-193b-5p的表达抑制胃癌细胞的增殖和侵袭。
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